Bộ phát hiện Mycoplasma（PCR

Ô nhiễm Mycoplasma sẽ gây ra những ảnh hưởng xấu đến mọi mặt của tế bào và đã trở thành một vấn đề được đánh giá cao trong nuôi cấy tế bào. Vì vậy, việc thường xuyên phát hiện nhiễm mycoplasma là rất cần thiết. Bộ phát hiện mycoplasma này sử dụng phương pháp PCR để phát hiện cụ thể sự nhiễm mycoplasma trong các vật liệu sinh học tế bào nuôi cấy khác nhau (chẳng hạn như nuôi cấy tế bào, dịch tiết của động vật thí nghiệm, huyết thanh động vật, v.v.). Các mồi hỗn hợp được sử dụng trong bộ sản phẩm là các mồi cụ thể được thiết kế cho vùng được bảo tồn của trình tự 16S rRNA của Mycoplasma. Quá trình khuếch đại PCR cụ thể của DNA Mycoplasma có thể được hoàn thành trong vòng một giờ với Mycoplasma PCR Mix (2×) phù hợp sử dụng dung dịch nuôi cấy tế bào làm mẫu PCR. Bộ dụng cụ này có độ nhạy cao và có thể phát hiện ít nhất 20 bản sao mycoplasma.

Tàu có đá ướt; Được lưu trữ ở -20 độ , có giá trị trong 12 tháng.

1. Chuẩn bị mẫu: Lượng chất nổi trên bề mặt nuôi cấy tế bào cần xét nghiệm thích hợp được đưa vào ống PCR sạch. Các ống PCR này được xử lý nhiệt ở 95 độ trong 5 phút trong thiết bị PCR và sử dụng nó làm mẫu. Các mẫu huyết thanh có thể được pha loãng bằng Mycoplasma Free Water và các mẫu thích hợp được đặt vào ống PCR sạch. Các ống PCR này được xử lý nhiệt ở 95 độ trong 5 phút trong thiết bị PCR và sử dụng nó làm mẫu. ;

2. Chuẩn bị phản ứng PCR: Đối chứng âm tính (thay 1 μL mẫu bằng cùng một lượng Nước không chứa Mycoplasma) và đối chứng dương tính (thêm 0,5 μL Kiểm soát dương tính vào 1 μL mẫu làm Mẫu) sẽ được đặt cho mỗi thí nghiệm. Đeo khẩu trang và găng tay dùng một lần trong quá trình thí nghiệm và vận hành một cách thận trọng để ngăn chặn việc nhiễm mycoplasma ngoại sinh không đúng cách;

3. Thiết lập chương trình PCR:

4. Điện di trên gel: Lấy 10 µL sản phẩm PCR và sử dụng gel agarose 1% để phát hiện điện di.

5. Phân tích kết quả: Trong mỗi thí nghiệm, độ nhiễm Mycoplasma của các mẫu bằng cách so sánh với kết quả đối chứng âm và đối chứng dương. Kích thước dải dương là khoảng 500 bp. Nếu có các dải trong kết quả xét nghiệm đối chứng âm tính thì có khả năng hệ thống PCR đã bị nhiễm bẩn và nên xác nhận lại kết quả. Nếu cần thiết, các sản phẩm PCR cũng có thể được giải trình tự thường xuyên để xác định các loài mycoplasma cụ thể.

1. Bộ sản phẩm này có thể phát hiện M. orale, M. arginini, M. bovis, M. người lên men, M. gallisepticum, M. hominis, M. pirum,Ureaplasma spp,M. hyorhini, M. viêm phổi, A. laylawii và ít nhất 11 loại ô nhiễm mycoplasma khác.

2. Tất cả thuốc thử phải được rã đông và trộn kỹ trên đá trước khi sử dụng và bảo quản ở nhiệt độ -20 sau khi sử dụng.

3. Phải đặt các đối chứng âm và đối chứng dương cho từng thử nghiệm và nhóm thử nghiệm khuyến nghị nên thiết lập độ dốc của mẫu mẫu.

4. Phải đeo khẩu trang trong quá trình vận hành và phải tuân thủ nghiêm ngặt các tiêu chuẩn vận hành PCR để tránh ô nhiễm ngoại sinh ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm.

5. Để đảm bảo độ tin cậy và ổn định của các thí nghiệm tế bào, nên phát hiện ô nhiễm mycoplasma thường xuyên.

6. Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và đeo găng tay dùng một lần.

Chỉ dành cho mục đích nghiên cứu!

Chú phổ biến: Bộ phát hiện mycoplasma（pcr, Bộ phát hiện mycoplasma Trung Quốc（pcr） nhà sản xuất, nhà cung cấp, nhà máy