Bộ phát hiện Mycoplasma nhanh chóng một bước (Phương pháp khuếch đại đẳng nhiệt)

Bộ dụng cụ này có thể nhanh chóng phát hiện 8 loại mycoplasma trong môi trường nuôi cấy tế bào bằng kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt và thay đổi màu sắc trực quan. Nếu không tách chiết DNA, 1 μL chất nổi trên bề mặt nuôi cấy tế bào được thêm trực tiếp vào dung dịch phản ứng và phản ứng ở nhiệt độ 65 độ trong 30 phút. Màu của mẫu dương tính thay đổi từ vàng sang đỏ và toàn bộ quá trình không cần dụng cụ PCR hoặc mở nắp để điện di, điều này có thể tránh được sự lây nhiễm chéo do khí dung gây ra một cách hiệu quả. So với phương pháp PCR truyền thống, sản phẩm này có ưu điểm là thao tác đơn giản, độ nhạy cao và có thể chịu được nhiều loại chất ức chế PCR trong môi trường nuôi cấy nên không có hiện tượng âm tính giả và kết quả phát hiện rất phù hợp với qPCR.

Vận chuyển kèm theo đá ướt và bảo quản ở nhiệt độ -20 ; có giá trị lên đến 12 tháng.

a:Chứa các tác nhân tạo màu.

Trước khi bắt đầu (vui lòng đọc kỹ)

Đặt trước bể nước 65 độ hoặc khối gia nhiệt bằng kim loại.

1. Chuẩn bị mẫu thử nghiệm:

Một. Tế bào kết dính: Hấp thụ trực tiếp chất nổi phía trên. Có ý kiến ​​​​cho rằng nên lấy mẫu khi quá trình cấy tế bào hoặc thay đổi chất lỏng kéo dài hơn 3 ngày và mức độ hợp lưu là khoảng 90%. Lúc này, hàm lượng mycoplasma trong chất nổi phía trên cao và có thể dễ dàng phát hiện.

b. Tế bào huyền phù: Chất nổi phía trên thu được sau khi ly tâm ở tốc độ 1,{1}} vòng/phút trong 5 phút. Có ý kiến ​​​​cho rằng nên lấy mẫu sau khi cấy tế bào hoặc thay chất lỏng trong hơn 3 ngày, khi hàm lượng mycoplasma trong môi trường nuôi cấy tế bào cao và có thể dễ dàng phát hiện.

2. Hệ thống phản ứng

a: Bộ đệm Mycored được sử dụng lộn ngược sau khi rã đông.

b: Theo số lượng mẫu, sau khi hệ thống phản ứng trên được chuẩn bị, đóng gói phụ vào ống phản ứng, thêm 20 μL Dầu Paraffin, sau đó tiến hành bước tiếp theo.

3. Thêm mẫu

Một. Đối chứng âm tính: Không có mẫu nào được thêm vào ống phản ứng đầu tiên làm đối chứng âm tính.

b. Kiểm soát dương tính: 1 µL Kiểm soát dương tính được thêm vào ống phản ứng cuối cùng làm đối chứng dương tính.

c. Mẫu cần kiểm tra: Thêm 1 µL dịch nổi nuôi cấy tế bào vào phần còn lại của ống phản ứng.

a: Vui lòng mở rộng đầu của đầu pipet dưới mức chất lỏng của dầu parafin để thêm mẫu.

4. Điều kiện phản ứng

Chuyển ống phản ứng sang bể nước hoặc bể kim loại đã được làm nóng trước ở nhiệt độ 65 độ để ủ trong 30 phút. Nếu sự phát triển màu sắc không rõ ràng thì thời gian phản ứng có thể kéo dài đến 40 phút.

Lấy ống phản ứng ra ngay sau khi kết thúc phản ứng, nếu dung dịch phản ứng vẫn có màu vàng sau khi đưa về nhiệt độ phòng thì kết quả sẽ âm tính. Nếu dung dịch phản ứng chuyển sang màu đỏ thì kết quả là dương tính. Không được mở ống phản ứng, nếu không sẽ dễ dẫn đến ô nhiễm khí dung.

1. Không mở ống phản ứng sau khi phản ứng kết thúc.

2. Có ý kiến ​​​​cho rằng nên sử dụng các đầu pipet có phần tử lọc trong quá trình chuẩn bị dung dịch phản ứng, đồng thời nên cho các đầu pipet và ống phản ứng bị loại bỏ vào túi tự hàn kín và xử lý kịp thời.

3. Vui lòng sử dụng dụng cụ quét axit nucleic (khuyến nghị G3020) để lau bàn thử nghiệm và pipet thường xuyên.

Chỉ dành cho mục đích nghiên cứu!

Chú phổ biến: nhà sản xuất, nhà cung cấp, nhà máy sản xuất bộ phát hiện mycoplasma nhanh một bước (phương pháp khuếch đại đẳng nhiệt) của Trung Quốc