Giải pháp tập trung Exosome

Exosome là các túi màng có kích thước nano có kích thước đồng đều, với kích thước hạt từ 30 đến 150nm, được các tế bào tích cực tiết ra vào không gian ngoại bào. Túi này có dấu ấn sinh học đặc hiệu riêng và chứa protein, mRNA, miRNA, lipid và các chất khác, có thể tham gia vào quá trình phát triển tế bào, tăng sinh, biệt hóa, di chuyển, hình thành mạch và phát triển khối u thông qua vật liệu giữa các tế bào và truyền tín hiệu.

Sản phẩm này là một dung dịch Exosome đậm đặc phổ biến, có thể nhanh chóng thu được một số lượng lớn các hạt Exosome hoàn chỉnh từ các mẫu sinh học lỏng như chất nổi trên bề mặt tế bào và huyết thanh động vật.

Vận chuyển ở nhiệt độ phòng; Bảo quản ở nhiệt độ phòng với thời hạn sử dụng là 12 tháng.

1. Tiền xử lý mẫu:

a) Mẫu sinh học exosome hàm lượng thấp (dùng "Cell Supernatant" làm ví dụ): Lấy dịch nổi tế bào, ly tâm ở 4 độ, 3000×g trong 10 phút để loại bỏ mảnh vụn tế bào; Ly tâm phần nổi phía trên một lần nữa ở 4 độ và 10000 × g trong 20 phút. Sau đó lọc phần nổi phía trên bằng màng lọc 0,22 μm và tinh chế để sử dụng sau.

b) Mẫu sinh học exosome hàm lượng cao (lấy "Huyết thanh động vật" làm ví dụ): Lấy huyết thanh động vật, ly tâm ở 4 độ, 3000×g trong 10 phút; Sau đó Ly tâm phần nổi phía trên ở 4 độ và 10000×g trong 20 phút. Lọc phần nổi phía trên lần cuối bằng màng lọc 0,22 μm. Sau khi tinh chế sơ bộ, pha loãng huyết thanh động vật theo tỷ lệ 1:9 đến 1×PBS để sử dụng sau.

2. Nồng độ exosome:

a) Lấy mẫu sinh học đã xử lý và trộn với thể tích exosome đậm đặc tương đương. Sau khi dao động xoáy mạnh trong 15 giây-60 giây, để yên trong 2 giờ ở 4 độ trong tủ lạnh (Tùy chọn: Dao động xoáy cứ sau 30 phút trong thời gian đứng yên).

b) Cho dung dịch đã hỗn hợp vào máy ly tâm, ly tâm ở 4 độ, 10000×g trong 60 phút; Loại bỏ phần nổi phía trên.

c) Thêm dung dịch đệm PBS đã được làm lạnh trước theo tỷ lệ 1 x thể tích PBS=100:1 theo thể tích của chất cô đặc exosome, rồi huyền phù lại và ly tâm để kết tủa (lưu ý: điều này tương đương với nồng độ 100× và khác nhau khối lượng PBS có thể được thêm vào khi cần thiết để nối lại).

d) Chuyển huyền phù nặng vào ống ly tâm 1,5mL và đặt vào máy ly tâm. Ly tâm ở 4 độ và 12000 vòng/phút trong 5 phút; Thu thập phần nổi phía trên.

e) Chất nổi phía trên rất giàu exosome và có thể được sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo. Nó cũng có thể được đóng gói và lưu trữ ở mức -80 để sử dụng trong tương lai.

1. Sản phẩm này có thể được bảo quản ổn định ở nhiệt độ phòng trong thời gian dài. Hãy lắc và trộn đều trước khi sử dụng.

2. Sản phẩm này có thể được sử dụng như một chất bổ sung cho nồng độ chất nổi trên bề mặt tế bào trong cột sắc ký tách exosome G4113 (chất nổi trên bề mặt tế bào).

3. Trong quá trình thí nghiệm, vui lòng mặc quần áo phòng thí nghiệm và đeo găng tay dùng một lần để tránh nhiễm bẩn và đảm bảo an toàn.

Chỉ dành cho mục đích nghiên cứu!

Chú phổ biến: giải pháp tập trung exosome, nhà sản xuất, nhà cung cấp, nhà máy giải pháp tập trung exosome Trung Quốc